使用大容量离心机分离血细胞准备步骤
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使用大容量离心机分离血细胞准备步骤
(一)材料与试剂1.抗凝剂
(1)肝素:肝素是含硫酸基的粘多糖,常用其钠盐或钾盐,它能阻止凝血酶原转化为凝血酶,进而抑制纤维蛋白原形成纤维蛋白,从而阻止血液凝固。常用的肝素溶液浓度为1000U/ml,市售肝素多为100U~126U/mg。
(2)乙二胺四乙酸(EDTA):是一种螯合剂。用生理盐水配制成4%的溶液备用。
(3)阿氏液(Alsever液),配方如下:枸橼酸钠(Na3C6H5O7·5H2O)0.80g枸橼酸0.0325g葡萄糖2.05g氯化钠0.42gH2O加至100.00ml混匀溶解后,114.3℃高压蒸汽灭菌10min备用。阿氏液中既含有枸橼酸钠抗凝剂,又含有细胞生存的营养,所以它既可做抗凝剂,又可做血细胞的保存液。
2.针头根据不同动物和采血部位,采用不同型号的针头,用前必须灭菌或消毒。
3.采血容器注射器或三角瓶等。
4.采血动物。
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