原生质体制备提取实验不能缺少老搭档——离心机,它可以说是原生质体制备提取实验必备仪器了。

　　原生质体制备提取作用有五点：

　　1.细胞融合。

　　2.原生质体中进行瞬时表达：亚细胞定位，蛋白和核酸相互作用。

　　3.利用膜片钳技术研究离子通道及原生质体在受光、胁迫和激素作用后的调节机制的研究。

　　4.细胞壁再生、细胞分裂与分化、摄入细胞器、病毒侵染机理、膜透性及离子转运等基础理论研究的理想材料。

　　5.被用来作为研究植物细胞钙信号转导及其调节机制的理想材料。

　　由此可见原生质体纯化的重要性。下面以植物为例，进行简单讲解:

　　纤维素酶和果胶酶能分解植物细胞壁，形成原生质体；加入0．6mol/l甘露醇的目的是维持原生质体正常的形态，防止原生质体吸水胀破；不同植物细胞结构不同，则原生质体结构不同；原生质体的结构由细胞膜、细胞质和细胞核组成。

　　将酶解后的组织液过尼龙网膜，去除未充分消化的组织碎片，选择与原生质体等渗的buffer清洗原生质体两次，离心去除碎片（一般采取50-100 g，离心机离心1-2 min左右），最后将原生质体重悬于适当浓度甘露醇中。可参考以下方法来降低原生质体悬液中的碎片占比：

　　1. 提前优化样本，比如剥去外皮（仅限于研究对象不包含外皮部分的样本）、弃去质地坚硬的组织和损伤组织。

　　2. 降低离心机离心转速和时间，去除留在上清中的碎片。

　　3. 如果原生质体起始量足够大，可考虑通过流式分选去除碎片。

　　以上就是关于离心机在原生质体制备提取实验中的应用，如果您还想了解更多有关离心机的信息，可以多多关注上海卢湘仪离心机仪器有限公司。