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利用离心机处理与测定血浆样品

发布时间:2014-4-2 10:59:19      点击:

取血浆200μl , 加10 %高氯酸溶液100μl ,漩涡混匀,10 000 r·min - 1离心5 min ,取上清液100μl ,加入NaOH 溶液50μl , 漩涡混匀30 s 后, 加入衍生化试液OPA100μl ,漩涡混匀,置暗处放置10 min ,吸取20μl 进样, 按上述条件测定,记录色谱图和GSH 衍生物峰面积A。

处理方法
1,200,100μl一般用移液枪比较方便,国产的还是进口的你可以根据实验要求和经费情况自己选择

2,我们做血浆样本时10 %高氯酸溶液蛋白沉淀,然后要调pH值的,当然你可以试验一下加入NaOH的量,以后不用每管都调pH的,加固定量就好

3,离心时转速我们一般就用16000rpm的,效果不错啊,转速的影响没有考察过,但是离心机转速较高时比较容易发热,如果你的药热不稳定的话要注意;

4,NaOH 溶液浓度和用量第2点已经说了

5,加入衍生化溶液后,要暗处放置应该是因为这个衍生化试剂或衍生化反应发生的条件需要避光,这个试剂应该比较成熟了

另外,空白血浆应该不是指不加衍生化试剂,而是除了不加药物,其他试剂和处理方法都和含药血浆一样,加衍生化试剂可以知道衍生化试剂对样品峰有没有干扰。

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