细胞离心机离心分离纯化法可以避免二次污染
细胞离心机通过离心技术使得细胞分离,是一种物质分离,不通过介质,就不出现二次污染。
细胞离心机采用的就是离心分离纯化法:
离心方法,包括差速离心法和密度梯度离心法,密度梯度离心法又分为速度-区带密度梯度离心法和等密度梯度离心法。在选用合理的方法对细胞或组织进行破碎后,首先要进行差速离心法,即根据不同离心速度所产生的不同离心力将各种细胞组分和颗粒分离开来。各种细胞器和颗粒典型的差速离心顺序见下表。
细胞离心机是利用离心力对混合液(含有固形物)进行分离和沉淀的一种专用仪器。细胞离心机有低速、高速离心机和低速、细胞离心机,以及超速分析、制备两用冷冻离心机等多种型号。而细胞离心机是带制冷系统的高速离心机。这种离心机的离心腔温度通常可降至零摄氏度以下。转速可达10000rpm以上,具有冷冻离心机的性能和结构外,细胞离心机所用角式转头多采用用钛合金或铝合金制成。离心管为具盖聚乙烯硬塑料制品。这类离心机多用于收集微生物、细胞碎片、细胞、大的细胞器、硫酸沉淀物以及免疫沉淀物等。那么,操作细胞离心机需要重点关注的问题有哪些呢?
操作细胞离心机需要注意的事项:
1.离心管内装载的溶液量必须合适,不锈钢管无盖,只能装2/3,塑料管可装至肩部。管盖必须盖严绝不允许漏液。空管离心会变形。塑料管使用有机溶剂必须符合规定。
2.离心管必须成对放置,必须严格平衡,偏差<0.1g。
3.不允许无转头空转,放取转头必须用手柄,以防转头滑落。转头要轻放、卡稳,旋下手柄时要用手扶住手柄只转转头。转头盖要盖严,无盖不准离心。
4.细胞离心机离心时不准打开机盖,不准扒扶在离心机上,如有异常声音和振动时立即停机。
5.转头使用后必须及时由转头室中取出、擦干,用擦孔棒将管孔仔细擦净。如有溶液溢出必须清洗干净,擦净转头室内凝水,开门凉干转头室。
6.使用离心机必须预约,用后必须登记。
7.未经过培训和考核者不能使用。
8.选择合适的转头和转速,绝不可超速使用。
9.选择合适的温度,通常4℃,除有机溶剂外不要低于零下,以免冰冻,损坏离心管和转头。
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